新疆喀什地区乳腺癌患者蛋白表达的分析及临床

乳腺癌属于我国较为常见的疾病,属于乳腺上皮组织的恶性肿瘤,一般出现在女性群体。乳腺癌细胞通常并不具备正常细胞的特性,细胞之间的连接相比于正常细胞更为松散,因此很容易脱落,一旦出现脱落情况,癌细胞在游离形态下就会随着淋巴液以及血液向患者全身播散,从而出现转移,对我国女性健康有着极大的威胁。据相关报道表明,乳腺癌患者约有5%～10%是遗传倾向性,其中45%与BRCA1 基因有关,35%与BRCA2 基因有关,并且大量研究能够充分表明乳腺癌的发生发展与BRCA1、BRCA2 有密切联系。除此之外,乳腺癌易感基因的确存在不同的突变,而我国新疆喀什地区的乳腺癌患病率在逐渐攀升,常年居高不下,因此深入探讨、分析新疆喀什地区乳腺癌患者BRCA1、BRCA2 蛋白表达具有十分重要的临床意义。本文就本院于2018 年1 月～2020 年2 月接诊的50 例乳腺癌患者作为研究对象,以此来探讨新疆喀什地区乳腺癌患者BRCA1、BRCA2 蛋白表达的临床意义,并进一步了解患者年龄、肿块大小、病理类型、组织学分级、淋巴结转移情况等与 BRCA1 和BRCA2 表达的关系,报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2018 年1 月～2020 年2 月本院接收的50 例乳腺癌患者作为观察组,选取同期10 例乳腺良性肿瘤患者为常规组,研究已通过医院伦理委员会的批准。常规组患者平均年龄(50.)岁,观察组患者平均年龄(50.)岁。两组患者一般资料比较差异无统计学意义(P＞0.05),具有可比性。纳入标准：①经手术治疗和病理检查(ER、PR、HER-2和Ki-67 等免疫组织化学检测结果)证实为乳腺癌患者［1］；②均为女性患者；③均行乳腺癌根治术或改良根治术；④术前未行放化疗；⑤均对此次研究知情并签署知情同意书。

1.2 方法 所有标本均使用4%甲醛固定,并通过石蜡包埋,切片厚度为3 μm,然后通过免疫组织化学SP法对其进行检测［2］。浓缩型鼠抗BRCA1 单克隆抗体与兔抗BRCA2 多克隆抗体均来自福州迈新公司,工作液浓度分别为1∶40、1∶50、1∶60,之后通过石蜡切片免疫组化 Envision 二步染色法进行检测,染色步骤如下［3］：①二甲苯脱蜡10 min×2 次；②梯度酒精洗(100%、90%、80%、70%)各1 min；③蒸馏水洗片刻；④3% H2O2去除内源性酶,室温10 min；⑤蒸馏水3 min×2 次；⑥Ki-67 切片微波抗原修复或高压抗原修复(现场操作)；⑦蒸馏水洗3 min×2 次；⑧PBS洗3 min×2 次；⑨加鼠抗人Ki-67 孵育放于湿盒中,4 ℃过 夜；PBS 洗3 min×2 次；Ki-67 加HR-PantiMouse/Rabbit 孵 育30 min 37 ℃；PBS 洗3 min×2 次；DAB 显色(棕褐色),镜下控制；自来水冲洗5 min；苏木素复染,水洗,梯度酒精(70%、80%、90%、100%)脱水；切片风干后中性树胶封片。

1.3 观察指标及判定标准 比较两组患者BRCA1、BRCA2 蛋白表达情况,BRCA1 与BRCA2 的阳性表达方式均为细胞核、细胞浆内出现棕色颗粒,BRCA1 阳性细胞数＜10%为阴性(-),≥10%为阳性(+)［4］；BRCA2胞质及胞膜无黄色阳性反应物或＜5%为阴性(-),≥5%为阳性(+)［5］。分析BRCA1、BRCA2 与乳腺癌临床病理特征的关系,病理特征包括组织学分级、患者年龄、淋巴结转移情况、肿瘤大小、组织类型等。

1.4 统计学方法 采用SPSS20.0 统计学软件处理数据。计量资料以均数±标准差()表示,采用t检验；计数资料以率(%)表示,采用χ2检验。P＜0.05 表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组患者BRCA1、BRCA2 蛋白表达情况比较 观察组患者的BRCA1 与BRCA2 阳性表达率明显低于常规组,差异具有统计学意义(P＜0.05)。见表1。观察组BRCA1与BRCA2蛋白表达定位主要在细胞质和细胞核；常规组BRCA1 与BRCA2 蛋白表达定位均在细胞核。

表1 两组患者BRCA1 与BRCA2 蛋白表达情况比较［n(%)］注：与常规组比较,aP＜0.05

2.2 BRCA1、BRCA2 与乳腺癌临床病理特征的关系分析 组织学分级：BRCA1 组织学分级Ⅰ级、Ⅱ级(-)11 例(22%),(+)10 例(20%),Ⅲ级(-)15 例(30%),(+)14 例(28%)；BRCA2 组织学分级Ⅰ级、Ⅱ级(-)13 例(26%),(+)10 例(20%),Ⅲ级(-)14 例(28%),(+)13 例(26%)。不同组织学分级患者的BRCA1、BRCA2 阳性表达率比较,差异均无统计学意义(χ2=0.0021、0.1090,P=0.9634、0.7412＞0.05)。

患者年龄：BRCA1 患者≤35 岁(-)13 例(26%),(+)12 例(24%),＞35 岁(-)11 例(22%),(+)14 例(28%)；BRCA2患者≤35 岁(-)5 例(10%),(+)14 例(28%),＞35 岁(-)19 例(38%),(+)12 例(24%)。不同年龄患者的BRCA1 阳性表达率比较,差异无统计学意义(χ2=0.3205,P=0.5713＞0.05)；不同年龄患者的BRCA2 阳性表达率比较,差异有统计学意义(χ2=5.7730,P=0.0163＜0.05)。

淋巴结转移情况：BRCA1 淋巴结转移0 枚(-)10 例(20%),(+)8 例(16%),1～3 枚(-)5 例(10%),(+)4 例(8%),4 枚 以 上(-)13 例(26%),(+)10 例(20%)；BRCA2 淋 巴结转移0 枚(-)11 例(22%),(+)7 例(14%),1～3 枚(-)6 例(12%),(+)3例(6%),4枚以上(-)12例(24%),(+)11例(22%)。不同淋巴结转移患者的BRCA1、BRCA2 阳性表达率比较,差异均无统计学意义(χ2=0.3651、0.5935,P=0.5457、0.4411＞0.05)。

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